《表1 本研究所用qRT-PCR引物》
参考冯新等[25]的方法,利用RNAprep Pure Plant Kit(TIANGEN,CHINA)试剂盒提取所有样品RNA,利用PrimerScriptTMRT Reagent Kit(Perfect Real Time)试剂盒(TaKaRa,Japan)反转录获得cDNA。利用DNAMAN软件根据MaWAT1s基因CDS序列设计定量引物(表1)。qRT-PCR反应在Roche LightCycler480上进行,以CAC基因作为内参基因。25μL qRT-PCR体系包含:Dream TaqTMGreen PCR Master(2×)12.5μL,ddH2O 9.5μL,模板cDNA 1μL,上下游引物各1μL。反应条件为:95℃变性5 s,60℃退火30 s,72℃延伸15 s;40(MaWAT1、MaWAT2和MaWAT4)/48(MaWAT3和MaWAT5)个循环。采用2-ΔΔct法计算不同组织器官和不同处理下MaWAT1s基因相对表达情况。利用SPSS软件进行显著性分析,利用GraphPad Prism 5软件作图。
图表编号 | XD00155487200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.05.10 |
作者 | 刘嘉鹏、屈蒙蒙、孙雪丽、伍俊为、刘范、田娜、程春振 |
绘制单位 | 福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所、福建农林大学园艺学院·园艺植物生物工程研究所 |
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