《表1 本研究所用qRT-PCR引物》

《表1 本研究所用qRT-PCR引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《香蕉WAT1基因的鉴定及表达分析》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录

参考冯新等[25]的方法,利用RNAprep Pure Plant Kit(TIANGEN,CHINA)试剂盒提取所有样品RNA,利用PrimerScriptTMRT Reagent Kit(Perfect Real Time)试剂盒(TaKaRa,Japan)反转录获得cDNA。利用DNAMAN软件根据MaWAT1s基因CDS序列设计定量引物(表1)。qRT-PCR反应在Roche LightCycler480上进行,以CAC基因作为内参基因。25μL qRT-PCR体系包含:Dream TaqTMGreen PCR Master(2×)12.5μL,ddH2O 9.5μL,模板cDNA 1μL,上下游引物各1μL。反应条件为:95℃变性5 s,60℃退火30 s,72℃延伸15 s;40(MaWAT1、MaWAT2和MaWAT4)/48(MaWAT3和MaWAT5)个循环。采用2-ΔΔct法计算不同组织器官和不同处理下MaWAT1s基因相对表达情况。利用SPSS软件进行显著性分析,利用GraphPad Prism 5软件作图。