《表1 引物序列及修饰的酶切位点》

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《人ALOX5AP基因启动子的克隆及生物信息学分析》


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在NCBI的Genebank数据库中检索人类ALOX5AP基因,并在Ensembl网站中查找转录起始点在基因中的准确位置(NCBI与Ensembl的网址见表3),以转录起始点作为+1,获取上游-2 000 bp至-1 bp的序列。针对此序列,利用软件primer premier 6.0设计引物(表1所示),用于人ALOX5AP基因启动子区域的PCR扩增。为方便后续载体构建,根据序列特点与pGL3-basic的多克隆位点,在引物的5’端引入合适的酶切位点(表1)。