《表1 PPARγ1的SUMO修饰位点突变引物》

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《PPARγ1的SUMO化修饰对巨噬细胞M2极化的抑制作用》


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使用常规分子克隆技术及点突变试剂盒,构建pCDNA3.1-3×FLAG-PPARγ1的野生型(WT)及突变型(K77R和K365R)质粒,在此基础上构建以pCDH-puro-vector为载体的3×FLAG-PPARγ1野生型及突变型质粒。双酶切位点为KpnⅠ及XhoⅠ,pCDH-puro-vector与插入片段使用SolutionⅠ等体积连接,DH5α转化后挑克隆,摇菌、小抽后进行酶切及测序鉴定。PPARγ1 SUMO化位点的突变引物见表1。