《表1 β-肌动蛋白、GK、Gys-2、G6pc、INSR、PPAR-γ和GLUT-4特异性引物》

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注：NM为基因库序列号代码。

根据表1，β-肌动蛋白作为内参，所有引物均由美国Applied Biosystem公司设计及合成。取组织RNA原液进行5倍系列的稀释50～5-4，运用Step One Plus Tm实时荧光PCR分析仪对β-肌动蛋白、GK、Gys-2、G6pc、PPAR-γ及GLUT-4基因进行扩增，采用自动分析软件绘制GK、G6pc、Gys-2、INSR、PPAR-γ、GLUT-4及β-肌动蛋白标准曲线，相关系数大于0.99且扩增效率在100%～110%。同时，GK、G6pc、Gys-2、INSR、PPAR-γ、GLUT-4及β-肌动蛋白的溶解曲线出现单特异峰且扩增曲线，无引物二聚体及非特异性扩增产物出现。确定GK、G6pc、Gys-2、INSR、PPAR-γ、GLUT-4及β-肌动蛋白引物合适，能够用于实时荧光PCR的基因表达差异的检测。