《表1 特异性引物与引入的酶切位点》
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《VHA-c2&c4双基因沉默株系拟南芥对NaCl与ABA的响应》
(1)分别提取野生型拟南芥和VHA-c2&c4沉默植株总RNA,反转录获得cDNA,再以cDNA为模板,分别对内参基因actin(GenBank登录号:At3g12110,引物为actin-RT-F和actinRT-R)和VHA-c2&c4(引物为c2-RT-PCR-F/R和c4-RT-PCR-F/R)进行PCR扩增(表1)。凝胶成像分析(Syngene公司凝胶成像仪)以上PCR产物。(2)对双基因沉默较强的植株的沉默片段特异性进行测定:根据(1)的结果,挑取双基因沉默较强的植株,以其反转录获得的cDNA为模板,分别对VHA-c1-VHA-c5进行扩增,将其产物进行凝胶成像分析以检测该株系的VHA-c1-VHA-c5的表达情况,进而检测沉默片段的特异性。
图表编号 | XD00171459000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.07.26 |
作者 | 苏杰、郭荣起、高阳、于秀敏、李国婧、王瑞刚 |
绘制单位 | 内蒙古农业大学职业技术学院、内蒙古农业大学内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室、内蒙古农业大学内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室、呼伦贝尔市农业科学研究所、内蒙古农业大学内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室、中国农业科学院草原研究所、内蒙古农业大学内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室、内蒙古农业大学内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室 |
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