《表1 特异性引物与引入的酶切位点》

《表1 特异性引物与引入的酶切位点》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《VHA-c2&c4双基因沉默株系拟南芥对NaCl与ABA的响应》


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(1)分别提取野生型拟南芥和VHA-c2&c4沉默植株总RNA,反转录获得cDNA,再以cDNA为模板,分别对内参基因actin(GenBank登录号:At3g12110,引物为actin-RT-F和actinRT-R)和VHA-c2&c4(引物为c2-RT-PCR-F/R和c4-RT-PCR-F/R)进行PCR扩增(表1)。凝胶成像分析(Syngene公司凝胶成像仪)以上PCR产物。(2)对双基因沉默较强的植株的沉默片段特异性进行测定:根据(1)的结果,挑取双基因沉默较强的植株,以其反转录获得的cDNA为模板,分别对VHA-c1-VHA-c5进行扩增,将其产物进行凝胶成像分析以检测该株系的VHA-c1-VHA-c5的表达情况,进而检测沉默片段的特异性。