《表1 特异性引物与引入的酶切位点》
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《沉默VHA-c4基因对拟南芥根长和种子萌发的影响》
拟南芥基因组DNA的提取方法采用CTAB法(Murray and Thompson,1980),以提取的g DNA为模板PCR扩增VHA-c4目的片段。正义链(Sense)特异引物为c4-s-5和c4-s-3,反义链(Anti-sense)特异引物为c4-as-5和c4-as-3(表1)。凝胶纯化回收PCR产物,利用XhoⅠ和Eco RⅠ双酶切的方法将正义链和pHANNIBAL载体连接,测序鉴定正确命名为pHAN-c4-s。同理,利用XbaⅠ和Bam HⅠ双酶切方法将反义链与载体pHAN-c4-s相连接,测序鉴定正确命名为pHAN-c4-s-as。最后,用NotⅠ单酶切pHAN-c4-s-as质粒,回收包含35 S启动子、ocs终止子、c4-s和c4-as片段的片段,并与经NotⅠ酶切pART27载体的回收片段相连接,测序正确的重组表达载体命名为pART-c4。
图表编号 | XD00156636300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.04.25 |
作者 | 武春燕、苏杰、郭荣起、高阳、李国婧、王瑞刚 |
绘制单位 | 内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室内蒙古农业大学、内蒙古农业大学职业技术学院、呼伦贝尔市农业科学研究所、内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室内蒙古农业大学、内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室内蒙古农业大学、内蒙古自治区植物逆境生理与分子生物学重点实验室内蒙古农业大学 |
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