《表1 乙醇脱氢酶酶活测定体系》

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《胃乙醇脱氢酶δδ-ADH的原核表达及酶学性质》

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乙醇脱氢酶δδ-ADH的酶活测定参照文献[11中的方法并稍作修改，酶活测定前，先将一定体积的0.1 mol/L甘氨酸/NaOH(pH10.0）缓冲液、NAD+及乙醇溶液于25℃温浴5 min，以确保反应开始时混合液即达到所需温度。然后向混合液中加入酶液，于25℃反应5 min，沸水浴终止反应并用分光光度计在340 nm测定吸光值，见表1。酶活定义：一个乙醇脱氢酶酶活相当于25℃、1 min氧化NAD+生成1μmol NADH所需的酶量。