《表1 酶活测定反应体系：乙醛脱氢酶在乳酸乳球菌中的表达与纯化》

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《乙醛脱氢酶在乳酸乳球菌中的表达与纯化》

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据文献[12-13]报道，ALDH以NAD+、NADH为辅酶，还原性的NADH在340 nm处有最大吸收峰。酶、辅酶NAD+和底物在一定条件下可以反应，通过测定一定时间内D340nm值的变化，就可以得到NADH生成量，从而计算酶活。取诱导后1 mL菌液，离心收集菌体，加入500μL TE缓冲液，超声波破碎后获得粗酶液；以pNZ8048/NZ9000为阴性对照。酶活测定体系见表1。配制反应体系后，在35℃金属浴中预热10 min，加入酶液，立即混匀，迅速倒入比色皿中，测定D340nm值。最适条件下，每分钟转化1μmol底物定义为1个活力（U），反应体系里ALDH的酶活计算公式为：