《表3.重组菌株纯酶酶活测定》

《表3.重组菌株纯酶酶活测定》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《多酶融合表达体系以木聚糖为辅助底物高效合成(S)-苯乙二醇》


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按照1.5中的方法,检测了重组菌株中3种酶的酶活,结果如表3所示,在重组菌株E.coli/p ET-SCRII-A258F-XYN2中,SCRII、A258F/GDH和XYN2分别为4.58、3.71、188.49 U/mg,而在重组菌株E.coli/p ET-A258F-SCRII-XYN2中3种酶酶活分别为6.54、2.43、231.78 U/mg。而SCRII、A258F/GDH和XYN2单独表达时的酶活分别为8.56、14.58、695.63 U/mg,均高于融合表达时3个酶的酶活,这可能是因为在融合蛋白中,3个基因位置的不同,空间位阻的不同,从而造成了这种酶活的差异。在重组菌株E.coli/p ET-SCRII-A258F-XYN2中,SCRII和A258F/GDH两者酶活相近,但是在重组菌株E.coli/p ET-A258F-SCRII-XYN2中,A258F/GDH酶活约为SCRII的2.7倍,这可能因为单独表达时A258F/GDH酶活就高于SCRII的酶活,同时在融合表达中SCRII基因在A258F/GDH之后,从而导致了A258F/GDH酶活比SCRII酶活高;而XYN2的酶活在2个重组菌株中均显著高于其他2种酶SCRII和A258F/GDH。