《表1 MDH酶活测定样品混合体系》

《表1 MDH酶活测定样品混合体系》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《非生物胁迫下戈壁异常球菌LEA3蛋白Dgl3抗逆功能研究》


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本实验通过检测A340变化评估MDH与LDH活性。所用缓冲液如下:MDH酶溶解液(50 mmol/L磷酸钾缓冲液,pH 7.2),MDH反应液(p H 7.5);LDH酶溶解液(25 mmol/L Tris-HCl,pH 7.5),LDH反应液(pH 7.5)。为测定Dgl3(0.12μg/μL)蛋白在氧化和反复冻融胁迫条件下对MDH(15μg/μL)和LDH(10.5μg/μL)酶活性的保护作用,以MDH与蛋白摩尔比1∶2.5、LDH与蛋白摩尔比1∶2混合样品,加入BSA(1μg/μL)作为阳性对照,加入溶解液作为空白对照。MDH样品混合体系如表1所示。将混合体系分别进行20 mmol/L H2O2处理10 min和15 min,液氮反复冻融(液氮处理1 min后室温融化为1个循环)3次,取每次处理后的样品10μL混匀加入到600μL对应的反应液中反应1 min,25℃条件下测定A340的变化。每个样品进行3次重复实验。