《表2 肝脏粗酶活表:一种来源于大菱鲆的热敏型尿嘧啶DNA糖苷酶的克隆表达及酶学性质鉴定》

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《一种来源于大菱鲆的热敏型尿嘧啶DNA糖苷酶的克隆表达及酶学性质鉴定》


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大菱鲆品系均来源于中国早期引进种(Taxonomy ID:52904)。通过序列分析初步获得了大菱鲆体内含有尿嘧啶DNA糖苷酶的线索。以热敏型大西洋鳕鱼UDGase氨基酸序列在Gen Bank数据库进行检索,发现在大菱鲆中存在UDGase-like氨基酸序列(Gen Bank登录号:AWP07077.1),随后利用Conserved Domain Database检索发现该序列具有UDGase超家族的典型结构域。与此同时,在Gen Bank上已公布的大菱鲆基因组测序结果中找到注释为Sm UDGase的m RNA序列,其翻译结果与该UDGase-like氨基酸序列完全相符。随后对大菱鲆肝脏匀浆上清进行UDGase活性检测发现:大菱鲆的肝脏匀浆反应样品与大肠杆菌UDGase样品均能使荧光值升高,大肠杆菌UDGase样品能在5min时达到荧光值293,大菱鲆肝脏匀浆样品的荧光值在20min内缓慢升高至40~70,而阴性对照的荧光值在5~10(表2),说明大菱鲆肝脏匀浆中具有UDGase酶活,进一步证实大菱鲆体内有可表达的UDGase基因。