《表1 梯度洗脱程序:一种新型亮氨酸5-羟化酶NmLEH的异源表达、纯化及酶学性质分析》

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《一种新型亮氨酸5-羟化酶NmLEH的异源表达、纯化及酶学性质分析》


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设定其各项参数为:采用Xterra C18柱色谱柱(5μm,4.6mm×250mm,Waters,Ireland),柱温23℃。流动相A为0.2mol/L CH3COONa缓冲液(以乙酸调p H 6.4)-乙腈(92∶8),即称醋酸钠27.216g,加水0.92L溶解,用乙酸调p H至6.4,再加入乙腈0.08L,使用0.22μm滤膜过滤:流动相B为乙腈-水(4∶1)。本实验采用梯度洗脱法,洗脱程序见表1,流速设为1ml/min。检测波长为360nm,进样量为10μl。