《表1 易错PCR引物:甲壳素酶Chisb的定向进化及生物转化合成几丁寡糖》

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《甲壳素酶Chisb的定向进化及生物转化合成几丁寡糖》


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以质粒pP43NMK_R13NprB-chisb-sp-his为模板,扩增chisb片段,所用引物如表1所示。易错PCR反应体系(30μL):Taq DNA聚合酶(5 U/mL)1μL,10×易错PCR Mix 3μL,10×dNTPs 3μL,MnCl2 4μL,dGTP 4μL,易错PCR引物各1μL,DNA模板1μL,超纯水12μL。用1%的琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物,并使用胶回收试剂盒回收PCR产物。反应条件:94℃3min;94℃1 min,45℃1 min,72℃1 min,重复30个循环;72℃5 min。