《表1 易错PCR及定点随机突变的PCR引物列表1)》

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《基于定向进化的烷基间苯二酚合酶改造》


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注:1) 下划线表示同源臂;加粗表示与模板互补区域;方框部分为随机突变位点。

质粒抽提试剂盒、DNA凝胶回收试剂盒和蛋白纯化试剂盒等均购于生工生物工程公司;随机突变试剂盒购于美国安捷伦公司;高保真酶、一步克隆试剂盒和定点突变试剂盒购于诺唯赞生物科技公司(南京);丙二酰-CoA、IPTG、氨苄青霉素(Ampicillin,Amp)和固蓝RR盐购于生工生物工程公司;其他试剂均为国产分析纯。脂肪酰-SNAC的合成基于Gilber方法[9]。引物合成和基因测序由北京擎科新业生物有限公司完成,引物设计如表1所示。