《表1 定点突变体的PCR引物》

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《定点突变提高环氧化物水解酶AuEH2催化对甲基苯基缩水甘油醚的对映选择性》

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利用Oligo 7设计突变引物，并由生工生物工程（上海）公司合成（表1）。采用全质粒PCR的方法进行定点突变[12]，以pET-28a-aueh2质粒为模板，PCR条件为:变性98℃，10s；退火52℃，15s；延伸72℃，3.5min，循环30次，72℃延伸10min。PCR产物经Dpn I酶消化后，转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞，涂布含卡那霉素抗性的平板，挑取单菌落培养，并测序验证。