《表1 定点突变引物序列》

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《HBV X基因突变促进肝癌发生的生物学机制》

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体外合成C2型HBV的HBx基因野生型序列，并通过XhoI及KpnI酶切位点克隆至真核表达载体pcDNA3.1/myc-His（-）B，通过测序验证重组质粒的正确性。设计C1653T、T1753C及A1762T/G1764A的定点突变引物，见表1，利用快速定点突变试剂盒对野生型重组质粒分别进行定点突变，构建包含4个突变位点的突变型重组质粒，测序验证其正确性。