《表1 脂肪酸合成相关酶基因的PCR引物序列》

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《黄花蒿醇提物对奶牛乳腺细胞中共轭亚油酸合成相关酶基因表达的作用》


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在Bio-Rad IQ5Real-Time PCR仪上进行,试验所用引物参考见下表1。选用管家基因β-Actin为内参。选用Ta Ka Ra Real-Time PCR试剂盒(SYBR Premix Ex TaqTMⅡ),反应体系为20μL:10μL SYBR Premix Ex Taq TMⅡ(2×),0.4μL上游引物,0.4μL下游引物,2μL cDNA模板,7.2μL dH2O。反应程序为:95℃30 s;95℃10 s;退火温度下20 s;72℃30 s;40个循环。熔解曲线程序为:95℃1 min;70℃1 min;温度变化为0.5℃/6 s。反应结束后,仪器自动生成关于Ct值的数据报告,再根据文献采用2-ΔΔCt法计算得知各基因的相对表达量。