《表1 碳青霉烯酶基因PCR引物序列》

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《eCIM联合mCIM试验对肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶分型的应用》

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PCR法检测5种碳青霉烯酶基因：KPC-2、OXA-48、IMP、NDM-1、VIM。反应体系为25.0μL，包括2×Taq PCR Master Mix 12.5μL、上下游引物（10.0μmol/L）各1.0μL、DNA模板1.0μL、ddH2O 9.5μL。反应条件为94℃预变性4min，94℃变性30s，退火（KPC-2 59℃；OXA48 57℃；IMP 57℃；NDM1 60℃；VIM 57℃）30s，72℃延伸（KPC-2 1min；OXA48 45s；IMP2s；NDM1 48s；VIM 32s）。产物经1g/L琼脂糖凝胶电泳后，用凝胶成像系统分析。PCR引物参照文献[6-7]设计，见表1。