《表1 PCR引物序列:碳青霉烯类耐药大肠埃希菌耐药基因型检测及同源性分析》

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《碳青霉烯类耐药大肠埃希菌耐药基因型检测及同源性分析》


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(1)PCR试剂与仪器:PCR试剂盒、琼脂糖(进口分装)、DNA Marker、电泳缓冲液等试剂为上海生工产品。扩增用瑞士罗氏cobas z 480型PCR仪进行。(2)PCR方法:煮沸法提取细菌DNA模板,实验严格按照试剂盒说明书操作。各引物序列(表1)由上海生工合成。扩增产物经(137V)凝胶电泳30 min后,置凝胶成像系统上成像。(3)基因测序:阳性扩增产物由上海生工公司进行纯化和测序,测序结果经BLASTn比对来确定碳青霉烯酶基因型。