《表1 引物核酸序列:猪源大肠埃希菌药敏试验及耐药基因检测》

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《猪源大肠埃希菌药敏试验及耐药基因检测》


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参照文献[14-15]的引物,在NCBI上对编号为13905339和4364198进行查找,并利用Primer6设计引物(表1),引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。扩增体系共25μL:2×Real Star Green Power Mixture 12.5μL、ddH2O 9.5μL,底物模板2μL,上、下游引物各0.5μL。扩增条件:95℃预变性3min;95℃30s,aadA160℃30s(aph (3′)55℃30s) ,72℃1min,共32个循环;72℃5 min,置-4℃保存。PCR产物经10g/L琼脂糖凝胶电泳检测,凝胶成像系统读取结果。