《表1 基因引物序列：沿海地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药基因分析和同源性研究》

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《沿海地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药基因分析和同源性研究》

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参考杨丽君等[5]所报道的方法，采用煮沸法提取细菌DNA模版:对常见VIM、IMP、SPM、SIM、GIM及OprD2碳青霉烯类耐药基因进行PCR扩增，引物由上海生工生物工程公司合成，引物见表1。PCR反应体系:dNTP 4μl、引物各1μl、10×Buffer 5μl，DNA聚合酶0.25μl，DNA模板2μl、加水至50μl。反应条件:95℃预变性5 min，95℃30 s，55℃30 s，72℃延伸1 min，35个循环，72℃10 min。扩增产物移置1.2%琼脂糖凝胶，电压:120 V，电泳30 min，经溴乙锭染色后凝胶成像，分析结果。