《表1 碳青霉烯酶基因引物序列及反应条件》

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《碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的药物敏感性及耐药基因检测》

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采用加热煮沸法提取细菌DNA：挑取分纯的3～5个细菌菌落悬浊于300μl dd H2O中，沸水煮10 min后，12 000 r/min高速离心5 min，吸取上清液-80℃保存备用。聚合酶链反应（PCR）扩增常见的3种碳青霉烯酶基因。反应条件和引物序列见表1[5-7]。PCR反应体系及反应过程参考金亮等[8]报道的条件进行，PCR扩增阳性产物送上海生工生物技术有限公司进行测序，结果与Gen Bank中BLAST程序的序列比对以确定其基因型。