《表1 小粒种咖啡树咖啡碱合成途径3个关键酶基因的引物序列》

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《小粒咖啡树咖啡碱合成途径中CaXMT1、CaDXMT1、CCS1表达差异及其与咖啡碱含量的相关性》


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(2)基因表达量测定q RT-PCR反应体系(20μL)为SYBR Premix Ex Taq(TaKaRa DR081A)10.0μL、PCR forward&reverse primer(10μmol/L)各0.8μL、cDNA 1st Strand(100 ng/μL)2μL和ddH2O 6.4μL。qRT-PCR程序为95℃30 s;95℃5 s,62℃30 s,40个循环。在65-95℃建立溶解曲线。以GAPDH作为内参基因[11],用2-ΔΔCt法计算基因相对表达量。引物序列见表1。