《表1 Amp C酶基因PCR引物序列》

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《43株ICU医院感染者分离的铜绿假单胞菌耐药和产AmpC酶基因型分析》


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7组PCR扩增引物:由上海生工生物工程技术有限公司合成[4],7组基因引物序列见表1。PCR扩增体系50μl:上游引物、下游引物(25μmol/L)各1μl,DNA模板2μl,10×PCR缓冲液5μl,d NTPs混合液(2.5 mmol/L) 4μl,Taq酶0.5μl,ddH2O补足至50μl;反应条件:预变性95℃3 min,变性94℃60 s,55℃退火60 s,72℃延伸60 s,进行35个循环,循环结束后72℃延长至10 min。产物经1.2%琼脂糖凝胶成像电泳1 h,EB染色,凝胶成像系统观察分析结果。并以阴沟肠杆菌029M模板为阳性对照,铜绿假单胞菌ATCC27853作阴性对照。