《表1 PCR引物序列:巴西橡胶树过氧化氢酶基因HbCAT2的克隆及表达分析》

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《巴西橡胶树过氧化氢酶基因HbCAT2的克隆及表达分析》


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依据本实验室的比较转录组,搜索到1个有差异表达的Unigene,注释为CAT基因,又借助橡胶树基因组数据库比对分析,得到CAT基因序列,在NCBI数据库中再次比对分析,确定完整的CAT基因序列。在基因两端分别设计基因全长扩增引物(表1),参考全彩虹等(2017,热带生物学报,8(2):133-140)的基因克隆方法,利用RT-PCR技术,经过变性、退火和延伸等步骤从橡胶树‘93-114’叶片中扩增出CAT基因cDNA全长。将该基因命名为HbCAT2。送Invitrogen公司进行测序验证。