《表1 PCR引物：羽衣甘蓝β-胡萝卜素羟化酶基因的克隆及表达分析》

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《羽衣甘蓝β-胡萝卜素羟化酶基因的克隆及表达分析》

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根据测序结果，设计荧光定量引物分别为BoBCH-F和BoBCH-R，以18S r RNA作为内参，引物为18S r RNA-F和18S r RNA-R（表1）。引物采用Roche LCPDS2软件设计并由北京擎科新业生物技术有限公司合成。qRT-PCR反应根据Quanti FastSYBRGreen PCR Kit试剂盒（Qiagen，Germany）说明书，在Light Cycler480Ⅱ型荧光定量PCR仪（Roche，Swiss）上进行反应。每个反应采用3个生物学重复和3个技术重复。反应结束后，应用2-△△Ct算法进行相对定量计算[12]。