《表1 叶绿素合成途径基因定量RT-PCR引物序列》

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《水稻黄叶突变体yl1的遗传分析和表型鉴定》

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秧苗移栽大田2周后（6月30日），分别取野生型和突变体的叶片，放入液氮中，将样品送至实验室中用RNA提取纯化试剂盒（Tiangen）进行总RNA的提取。然后用RNA反转录试剂盒（Ta Ka Ra）获得c DNA。定量RT-PCR的仪器为ABI prism 7500定量RT-PCR系统。反应体系（20μL) :10μL反应液（ABI）、1μLc DNA模板、0.8μL10μmol/L定量PCR特异引物，8.2μL ddH2O，重复3次。水稻Actin基因（Os03g0718150）作为内参。反应程序：95℃，30 s；95℃，5 s；60℃，30 s；共40个循环反应；95℃，15 s；60℃，1 min；95℃，15 s。反应结果采用2-△△CT法进行数据分析。用于分析的基因包括HEMA（谷氨酰-t RNA还原酶基因）、HEML（谷氨酸-1-半醛转氨酶基因）、CHLD（镁螯合酶D亚基基因）、HCLH（镁螯合酶H亚基基因）、CHLI（镁螯合酶I亚基基因）、CRD（镁原卟啉Ⅸ单甲酯环化酶基因）、DVR（二乙烯还原酶基因）、PORA (NADPH依赖的原叶绿素酸酯氧化还原酶基因）、CHLG（叶绿素合成酶基因）、CAO（叶绿素酸酯a氧化酶基因），引物序列见表1[16]。