《表1 Realtime-PCR引物列表》

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《SIRT7通过抑制内质网应激蛋白GRP78减轻脂多糖或D-氨基半乳糖/脂多糖诱导的肝细胞凋亡》


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注:(1)核糖体蛋白L13a(ribosomal protein L13a),内参基因;(2)白介素6(interluekin 6);(3)肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα)

取20~30 mg肝组织,加入500μL TRIzol(Invitrogen,美国)进行匀浆。匀浆后按照标准操作办法抽提组织RNA。利用AMV反转录酶(TaKaRa,日本)将mRNA反转录成cDNA。采用Power SYBR green PCR Master Mix荧光实时定量试剂盒(Applied Biosystems,美国)进行实验,设计针对目的基因扩增的荧光定量PCR引物(表1)。