《表1 本研究引物序列表》

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《有氧运动通过TLR4/miR-223/NLRP3信号通路轴介导CUMS抑郁小鼠海马炎症反应》


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按照说明书使用高容量的cDNA逆转录试剂盒进行cDNA的合成。使用PrimeScript?RT Master Mix Perfect Real Time kit定量检测NLRP3、TLR4、IL-1β、IL-10和NF-κBmRNA的表达水平,One Step PrimeScript?miRNA cDNA Synthesis Kit试剂盒逆转录试剂盒和SYBR Green PCR Master Mix Kit(Applied biosystems)PCR试剂盒逆转录与定量miR-223的水平。实时荧光定量PCR使用CFX Connect PCR系统(Bio Rad,USA)进行40个循环的PCR,GAPDH和U6作为内部参照。根据Gene Bank核酸数据库中神经组织各因子c DNA序列,NLRP3、TLR4、IL-1β、IL-10和NF-κBmRNA基因引物均由上海生工生物工程技术服务有限公司设计合成,miR-223、U6亦按照miRBase database数据库中的碱基由广州Ribobio生物科技有限公司提供(引物合成序列详见表1)。PCR检测过程每样本设3个重复,测试结果采用2-△△Ct法计算组织中基因表达水平。