《表1 文中所用引物列表》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《大丽轮枝菌微丝荧光标记载体构建及应用》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

以Lifeact-mCherry-F/Lifeact-mCherry-R从质粒pentry-Lifeact-mCherry中PCR扩增目的基因片段（引物见表1，在5′端和3′端分别引入Bam HⅠ和Eco RⅠ酶切位点，在插入片段正反向引物的5′端各引入约15 bp的线性化载体两末端同源序列）；质粒载体pSULPH-mut-RG#PB使用限制性内切酶Bam HⅠ和Eco RⅠ进行双酶切线性化后，用One Step Cloning Kit将克隆所得的目的基因片段连入表达载体；菌落PCR鉴定为阳性克隆的菌落，提质粒酶切鉴定或测序进一步确认。电击转化法将连有目的片段的重组质粒转入农杆菌AGL1中，取阳性克隆进行培养；利用农杆菌介导的遗传转化（Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation，ATMT）方法将pSULPH-LifeactmCherry微丝标记表达载体转入V.dahliae野生型V592，单孢分离后经抗生素筛选获得微丝荧光标记菌株V592/Lifeact-mCherry。