《表1 所用引物序列及用途列表》

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《陆地棉GhDAHP基因的克隆与表达分析》


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根据3个同源基因GhDAHP-1、GhDAHP-2和GhDAHP-3的核苷酸序列设计特异性引物(表1),以陆地棉cDNA为模板进行PCR扩增,扩增体系:c D-NA为1.5μL,Mix 12.5μL,上游、下游引物各1μL,dd H2O 9μL;扩增程序:94℃5 min,94℃30 s,60℃30 s,72℃2 min,35个循环,再延伸72℃10 min,4℃保存。1.2%琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行检测,回收目的条带,将PCR产物连接克隆载体pMT-19,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,PCR菌液鉴定后送昆泰锐生物科技有限公司测序(加得拉·吐留汗等,2016;李静等,2017;李娟等2017;倪志勇等,2017)。