《表1 研究所用引物及序列表》

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《酸性矿业废水对土壤剖面中氮代谢功能基因丰度的影响》

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微生物总DNA提取采用CTAB法提取[27]，DNA样品用1%的琼脂糖凝胶电泳检测后置于零下20℃冷冻保存。参与氮转化的功能基因用上下引物在PCR仪里扩增后得到标准品，引物序列见（表1）。经扩增后纯化并嵌入到pEASY-T3克隆载体（全式金，中国北京）中，并将连接产物转染到Trans1-T1 phage-resistant chemically competent cell（全式金，中国北京）。从阳性克隆中抽提出的质粒被用来作为标准品并进行荧光PCR（qPCR）定量，测定土壤剖面中功能基因的丰度。