《表1 本研究所用引物及序列》

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《雌、雄弓背青鳉(Oryzias curvinotus)肝脏转录组比较分析》

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利用RT-q PCR技术，弓背青鳉雌雄肝脏转录组中选择12个基因进行定量验证（引物见表1）。RT-q PCR反应体系15μL，包含7.5μL 2×Power Green q PCR Mix （东盛生物，广州），0.6μL上下游引物（10μmol/L），1.5μL c DNA，4.8μL dd H2O。每个样品技术重复3次，反应置于Roche Light Cycler 96（罗氏，瑞士）上运行。反应程序如下:95°C 3min；95°C 15s，60°C15s，72°C 30s （采集荧光），40个循环；熔解曲线分析检测PCR产物的特异性。gapdh和adp作为内参基因，使用SPSS17.0采用2–ΔΔCt方法对目的基因表达水平进行统计（Livak et al，2001）。