《表1 建库所用引物列表》

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《利用ATAC-seq技术在人免疫细胞中检测染色质开放性的方法建立》

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按每个样本需要50μL反应体系配制转座工作液，其中含2.5μL Tn5转座酶、25μL转座缓冲液和22.5μL无核酸酶纯水。使用转座工作液重悬细胞核样本，将其转移至恒温振荡器中，于37℃恒温孵育并振荡30min。转座反应完成后使用DNA纯化浓缩试剂盒纯化DNA样本，用10μL RSB洗脱DNA。将转座后DNA片段、HiFi PCR Master Mix以及建库用PCR引物（表1）配制成PCR反应体系。先运行5个PCR循环，取出一部分加入SYBR GreenⅠ染料和ROX染料进行实时定量PCR以确定剩余所需循环数。完成全部PCR循环后，使用Agencourt AMPure XP磁珠纯化并回收DNA，以25μL无核酸酶纯水洗脱建库后的DNA片段。