《表1 荧光定量PCR引物列表》

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《柳枝稷TIFY基因家族的鉴定与分析》


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注:PviTIFY10aF与PviTIFY10aR同时扩增PviTIFY10e,PviTIFY10f与PviTIFY10a基因;PviTIFY10bF与PviTI-FY10bR同时扩增PviTIFY10g,PviTIFY10h与PviTIFY10b基因;EF-1-alpha为柳枝稷实时荧光定量PCR的内参基因[23]

RNA提取及荧光定量PCR:利用RNAiso Plus提取上述材料总RNA,参照PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time)说明书进行反转录,使用Primer Premier 6.0设计基因特异引物;按照TB GreenTMPremix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)说明书配置荧光定量PCR体系10μl;使用QuantStudioTM3Flex Real-Time PCR System进行PCR反应,两步法;利用SigmaPlot12.5软件处理数据、制作图表,相对表达量以2-△△CT法计算。引物序列如表1所示。