《表1 荧光定量PCR引物》

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《H5N1禽流感病毒感染雏鸭免疫器官TGF-β1 mRNA转录及病理损伤的变化》

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m RNA转录变化检测参考GenBank上已发表的相关序列，利用Primer 5.0软件设计TGF-β1和β-actin基因PCR扩增引物，送上海生工生物技术有限公司合成。用Trizol法提取胸腺、脾脏、法氏囊的总RNA，采用PrimeScript反转录试剂盒，合成cDNA，再以cDNA为模板用SYBRGreen I法进行RT-PCR测定，每组设3个重复。反应体系20L:SYBR Premix Ex Taq TM（2×）10L，上游引物和下游引物（10mol/L）各0.15L，ROX Reference Dye II（50×）0.4L，cDNA模板2.0L，无菌纯净水7.3L。PCR扩增程序:95℃预变性10 s；95℃变性5 s；60℃退火34 s，40个循环。每次反应每个样品做3个重复，并计算2-ΔΔCT。引物序列及产物长度（见表1）。