《表1 荧光定量PCR引物》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《垫料对异位发酵床中四环素抗性基因及Ⅰ类整合子丰度的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

采用实时荧光定量PCR仪（BIO-RAD，伯乐）进行定量PCR反应，采样单元在96孔板中进行测定，毎个孔采用10μL反应体系，将样品定量PCR所得Ct值用相应标准曲线换算成目的基因浓度（copies/g），每个样品设置3个重复（引物信息见表1）。TC-ARGs和int I1的扩增程序为：95℃预变性30 s；然后进行40个循环的扩增过程，每个循环包括95℃变性5 s，在退火温度下退火30 s，再在72℃下延伸30 s，延伸的同时扫描荧光信号，溶解曲线程序为55～95℃之间，毎0.5℃读数，其间停留30 s；16S r RNA的扩增程序为：98℃预变性2 min；然后进行39个循环的扩增过程，每个循环包括98℃变性10 s，在56℃下退火1 min，再在72℃下延伸30 s，延伸的同时扫描荧光信号，溶解曲线程序为65～95℃之间，毎0.5℃读数，其间停留5 s。