《表1 荧光定量PCR引物》

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《镉和铅联合作用对黑腹果蝇发育及抗氧化的影响》

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通过黑腹果蝇基因组数据库（http://flybase.org/），采用BLAST的方法筛选出MTN及其他基因序列，并根据以上查找的序列设计用于荧光定量PCR的引物（表1）。根据说明书上的方法采用RNAiso Plus试剂盒（Takara，Dalian，China）提取CK及Cd0.5+Pb2.9处理组7日及28日龄成虫总RNA，以RNA为模板采用SuperScriptTM II RTase（TaKaRa，Dalian，China）试剂盒反转录cDNA。通过荧光定量PCR和相对定量2-△△Ct法检测不同基因在不同时间段的相对表达量（Livak et al.，2001）。PCR程序为第一阶段95℃预变性1 min；第二阶段95℃保持10 s，60℃保持25 s，45个循环。