《表1 荧光定量PCR引物》

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《基于高通量测序对人胃癌组织长链非编码RNA差异表达的分析》

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为验证芯片结果的可靠性，重新提取30对胃癌患者癌组织与癌旁组织，对部分差异表达的lncRNA进行定量反转录聚合酶链反应（quantitative reverse transcription polymerase chain reaction，qRT-PCR）验证。挑选芯片结果中表达最高和最低以及转录因子-lncRNA网络图中关键的5个lncRNA。按照说明书使用PrimeScript RT试剂盒（RR037A，日本TaKaRa）将每种RNA反转录成cDNA，然后使用SYBR Premix Ex Taq TM试剂盒（RR820A，日本TaKaRa）进行qRT-PCR，内参为GAPDH。使用2-ΔΔCt法计算候选lncRNA的相对表达量。其中PCR引物由上海生工生物公司设计，引物序列见表1。