《表1 RT-qPCR分析所用引物》

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《SIRT7对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白、乳脂和乳糖合成关键基因表达的调控》

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注:ELF5:ETS转录因子5基因E74-like factor 5 gene；GLUT1:葡萄糖转运蛋白1基因Glucose transporter 1 gene；GLUT4:葡萄糖转运蛋白4基因Glucose transporter 4 gene；SREBP1:固醇调节元件结合蛋白1基因Sterol regulatory element binding protein 1 gene；γ-PPAR:γ过氧化物酶体增

收集过表达转染48 h后的DCMEC，根据试剂盒步骤提取总RNA，反转录成c DNA，进行RT-qPCR反应，测定乳蛋白、乳脂和乳糖合成关键基因的mRNA相对表达量。引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成，引物序列见表1。RT-qPCR 20μL体系如下:qPCR Master Mix（2×）10μL，上、下游引物（10μmol·L-1）各0.4μL，模板c DNA 2μL；无菌蒸馏水7.2μL。反应条件:95℃30 s；95℃10 s，60℃30 s，40个循环；95℃15 s，60℃60 s，95℃15 s。用2-ΔΔCT法计算各基因的相对表达量。