《表1 RT-qPCR引物序列》

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《黑灵芝多糖对免疫抑制小鼠肠道黏膜形态及肠道黏膜免疫的影响》

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取适量小肠组织样品，参照Trizol提取法的详细说明提取总RNA并定量，琼脂糖凝胶电泳对总RNA质量进行检测后，使用PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser（Perfect Real Time）试剂盒逆转录获得cDNA。使用SYBR Premix Ex Taq?II（Tli RNaseH Plus）试剂盒进行反转录定量PCR（reverse transcription-quantitative PCR，RT-qPCR）扩增，扩增程序为:95℃预变性1 min 30 s；95℃15 s，60℃1 min，72℃30 s，共40次循环，引物序列见表1。同时检测SYBR GreenⅡ和校正染料ROX Reference Dye的荧光信号。