《表1 RT-qPCR引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《不同品种茶树新梢响应“倒春寒”的转录组分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

为确保转录组数据的可靠性，我们共选取了18个可能参与低温响应的差异基因进行实时荧光定量PCR（Real time quantitative PCR，RT-qPCR）验证，相关基因编码蛋白涵盖了催化酶类、转录因子和结构蛋白等，通过Premier Primer5软件设计RT-qPCR引物（表1），引物序列由北京擎科新业生物技术有限公司合成。通过FastKing gDNA Dispelling RT SuperMix反转录试剂盒将RNA反转录成cDNA，统一稀释至终浓度10 ng·?L-1。采用相对定量的方法，以GADPH为内参基因，正常新梢为对照（CK），RT-qPCR的反应体系为2×SYBR Green Master 5?L，cDNA模板1.5?L，上下游引物各0.4?L，加灭菌水至终体积10?L。反应程序为:95℃预变性10 min；94℃变性10 s，58℃退火15 s，72℃延伸12 s，反应进行40个循环；3次技术重复，采用2-（35）（35） CT算法计算基因的相对表达量。