《表1 RT-qPCR引物序列》

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《LPS对乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮间质转化的诱导作用及其对β-catenin表达的影响》

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取各组MDA-MB-231细胞采用RNAiso Plus提取总RNA，逆转录为cDNA，RT-qPCR法检测各组细胞中E-cadherin、Vimentin和β-catenin mRNA表达水平。实验过程按试剂盒说明书进行，E-cadherin和Vimentin PCR反应条件：94℃预变性4min，94℃变性40s，60℃退火30s，70℃延伸30s，循环40次，70℃延伸10min。β-catenin PCR反应条件：94℃预变性4min，94℃变性40s，58℃退火30s，70℃延伸30s，循环40次，70℃延伸10min。反应结束后，取扩增得到的PCR产物5μL于2%琼脂糖凝胶电泳，应用凝胶成像系统进行扫描。以目的基因与β-actin基因灰度值比值表示mRNA相对表达水平。引物设计：在NCBI上搜索目的基因的序列，采用Primer 5软件设计引物，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成引物。见表1。