《表1 RT-qPCR引物序列》

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《小鼠胚胎大脑皮质活化和静息神经干细胞的初步分离与鉴定》


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取流式分选出的大、小细胞,利用RNeasy Mini Kit试剂盒提取总RNA,再使用逆转录试剂盒合成cDNA。从NCBI GenBank中查找cDNA序列,利用Primer Premier 5.0软件设计引物,由上海华津生物有限公司进行引物合成,具体引物序列见表1。RT-qPCR选用ABI 7500荧光定量PCR系统。反应条件为:95℃预变性5 min;95℃变性10 s,60℃退火延伸55 s,40个循环。反应体系如下:上、下游引物各1.25μL,12.5μL SYBR Green I Master,2μL cDNA,ddH2O补足25μL。