《表1 RT-qPCR引物设计》

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《鸽骨骼肌卫星细胞的分离、培养及成肌特性》

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使用Triozl试剂提取消化法分离培养至第3天和第7天的细胞总RNA，并用Ta Ka Ra逆转录试剂盒反转成cDNA，根据鸽Desmin、Pax7、MyoG、MyoD1、β-actin基因序列，使用NCBI-Primer设计引物（表1），并由四川擎科生物公司合成。采用10μL PCR反应体系，含1μL cDNA，1μL上下游引物、5μL SYBR premix Ex Taq II、3μL DEPC水。RT-qPCR反应条件如下:95℃30 s；95℃5 s，60℃30 s，进行40个循环，反应结束后进行熔解曲线绘制。Desmin、Pax7、MyoG和MyoD1基因的相对表达量使用2Δ-ΔCt方法进行计算。