《表1 RT-qPCR实验引物设计序列》

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《SCNM1在乙肝相关性肝癌中的表达及临床意义》


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按RNA提取试剂盒的步骤提取RNA,用分光光度计进行RNA浓度和纯度分析。将提取的总RNA逆转录为cDNA。使用Primer Premier 5.0软件设计SCNM1和内参照β-actin的引物序列(表1)。将1μL cDNA+0.5μL目的基因上游引物+0.5μL目的基因下游引物+8μL SYBR+8μL双蒸水建立20μL的反应体系,按“98℃1 min;98℃10 s、60℃30 s、72℃1 min,42次循环;72℃10 min”的反应条件放入PCR仪内进行扩增。计算目的基因的相对表达量,以2-ΔΔCt法计算目的基因的相对表达量。