《表1 RT-qPCR实验的引物序列》

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《脱细胞随机肌腱支架促进骨髓间充质干细胞骨向分化》

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将BMSCs以1×105/cm2的密度种植在不含支架的24孔板（对照组，control group）和随机肌腱ECM支架上（实验组，random group）上。培养14 d后，将随机ECM支架转移至新的24孔板中，PBS清洗2次；加入2 mL胰酶，37℃下消化5 min，镜下观察到有脱落的圆形细胞时，加入6 mL培养基中和，然后利用培养基清洗支架3次，收集所有液体；2 000 r/min离心5 min，去上清；使用RNeasy Plus Mini Kit提取BMSCs总RNA，逆转录获得cDNA，利用real-time PCR技术检测肌腱标志物I型胶原蛋白（collagen type I，Col I）、肌腱特异转录因子scleraxis(SCX）及成骨标志物碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2，RUNX2）的mRNA表达水平。所用引物序列如表1所示。GAPDH作为内参照，通过2-??Ct法计算各组mRNA的表达量。