《表1 RT-qPCR引物序列》

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《SUMO特异性蛋白酶3通过调控巨噬细胞极化促进磷酸钙诱导的小鼠腹主动脉瘤形成》

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TRIzol一步法提取小鼠腹主动脉瘤体组织中的RNA后，利用NanoDrop 2000分光光度计检测样品RNA浓度，并注意A260/A280是否在1.8～2.0范围，以判断RNA提取过程中是否有污染。之后按照TaKaRa的PrimeScript?RT reagent Kit使用说明书，进行逆转录操作。qPCR按照TaKaRa SYBR?Premix Ex Taq?（Perfect Real Time)Kit说明书，在冰上将扩增体系中的各组分充分混匀后，使用LightCycler?480型实时荧光定量PCR仪检测。采用两步法荧光定量PCR扩增程序进行扩增。反应结束后检查实时荧光定量PCR的扩增曲线是否正常，融解曲线是否为单峰。计算公式：ΔCt=Ct目的基因-Ct内参照（GAPDH）；ΔΔCt=ΔCt待测样品-ΔCt对照样品；相对表达量=2-ΔΔCt。引物由中国生工生物有限公司负责合成，主要引物序列见表1。