《表1 RT-qPCR的引物序列》

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《加味脑泰方对去势脑缺血大鼠海马ATF4/CHOP/Puma通路的影响》

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脑缺血造模24 h行神经功能评分后，大鼠用腹腔注射0.1 kg/L水合氯醛麻醉，将在冰盒上快速取右侧海马组织置于液氮冻存，-80℃冰箱保存备用，用1 m L TRIzol提取海马组织总RNA，具体操作按照TRIzol试剂盒说明的步骤进行，RNA的浓度和纯度分别通过紫外分光光度计测定和电泳检测。按照逆转录试剂盒合成cDNA并进行PCR扩增，反应条件为:95℃15 min；95℃20 s、59℃1 min、95℃15 s、72℃15 s，40个循环。反应结束后确认PCR的扩增曲线和熔解曲线，得出Ct值，同一cDNA样本设3个复孔，求其Ct均值，并以β-actin的Ct值作为内参照。引物序列见表1。