《表1 RT-qPCR引物模板》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《上皮间质转化相关因子在胃癌转移中的表达变化》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

收集后的CTC行单细胞RT-qPCR，检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin。Single cell-to-Ct试剂盒提取细胞总RNA，反转录合成cDNA，并以E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及GAPDH对应引物进行预扩增。预扩增后产物2 uL加入25 uL含对应引物的SsoAdvanced SYBR Green Supermix进行qPCR，采用SYBR green荧光标记法检测PCR产物。检测各基因表达水平，以GAPDH为内参照。RT-qPCR结果采用仪器自带软件分析，根据标准曲线计算基因拷贝数。记录各实验组荧光信号到达所设定的阈值时所经历的循环数即Ct值，以GAPDH为内参，计算目的RNA的相对表达量（2-ΔΔCt）。SGC7901细胞及胃癌组织中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin mRNA表达水平检测同上所述。所有引物序列由上海生工生物工程有限公司合成，引物的设计根据Genbank的基因序列、用Primer 5.0软件设计，引物序列见表1。